| 1 適用范圍
本標(biāo)準(zhǔn)適用于地面水、地下水及工業(yè)廢水中中基對(duì)硫磷、對(duì)硫磷、馬拉硫磷、樂(lè)果、敵敵畏、敵百蟲的測(cè)定。
本方法用三氯甲烷萃取水中上述農(nóng)藥，用帶有火焰光度檢測(cè)器的氣相色譜儀測(cè)定。在測(cè)定敵百蟲時(shí)。出于極性大、水溶性強(qiáng)，用三氯甲烷萃取時(shí)提取率為零，故采用將敵百蟲轉(zhuǎn)化為敵敵畏后再行測(cè)定的間接測(cè)定法。
本方法對(duì)甲基對(duì)硫磷、對(duì)硫磷、馬拉硫磷、樂(lè)果、敵敵畏、敵百蟲的檢出限為10－9～10－10g，測(cè)定下限通常為5×10－4～10－5mg／L。當(dāng)所用儀器不同時(shí)，方法的檢出范圍有所不同。
2 試劑和材料
2.1 載氣和輔助氣體
a.載氣：氮?dú)?，純?/span>99.9％，用裝分子篩凈化管凈化。
b.燃燒氣：氫氣，純度99.9％，用裝分子篩凈化管凈化。
c.助燃?xì)猓嚎諝?，用裝分子篩凈化管凈化。
2.2 配制標(biāo)準(zhǔn)樣品和試樣預(yù)處理時(shí)使用的試劑和材料
2.2.1 色譜標(biāo)準(zhǔn)物：甲基對(duì)硫磷、對(duì)硫磷、馬拉硫磷、樂(lè)果、敵敵畏、敵百蟲.純度均為95％～99％。
2.2.2 三氯甲烷（CHCl3）：分析純。
2.2.3 無(wú)水硫酸鈉（Na2SO4）沖：分析純。
2.2.4 氫氧化鈉（NaOH）：分析純。
2.2.5 鹽酸（HCl）：分析純，P＝1.19g／mL。
2.3 制備色譜柱時(shí)使用的試劑和材料
2.3.1 色譜柱和填充物參考3.4條有關(guān)內(nèi)容。
2.3.2 涂漬固定液所用溶劑：三氯甲烷（2.2.2）。
3 儀器
3.1 儀器型號(hào)：配備有火焰光度檢測(cè)器的氣相色譜儀。
3.2 記錄器：與儀器相匹配的記錄儀。
3.3 檢測(cè)器
3.3.1 類型；火焰光度檢測(cè)器。
3.3.2 器件的特性：火焰光度檢測(cè)器采用磷濾光片，所用光電倍增管高壓及高阻通常分別為675V和1070。3.4 色譜柱3.4.1 色譜柱類型及特征硬質(zhì)玻璃填充柱，長(zhǎng)2m，內(nèi)徑4mm。3.4.2 色譜柱的預(yù)處理
經(jīng)水沖洗后，將玻璃柱管內(nèi)注滿洗液浸泡2h（必要時(shí)可將洗液溫?zé)嵝Ч?/span>），然后用自來(lái)水沖洗至中性，蒸餾水沖洗烘干后進(jìn)行硅烷化處理：將6％～10％的二氯二甲基硅烷－甲醇溶液注滿玻璃柱管浸泡2h，然后用甲醇清洗至中性，烘干備用。
3.4.3 填充物
3.4.4.1 載體
白色酸洗硅烷化硅藻土擔(dān)體（0.15～0.20m／m）。
3.4.4.2 固定液
a.名稱及化學(xué)性質(zhì)：二甲基硅油（DC-200），聚氟代烷基硅氧烷（QF-1），zui高使用溫度250℃。
b.液相載荷量：DC-200為5％，QF-1為7.5％。
c.涂漬固定液的方法：根據(jù)擔(dān)體的重量稱取一定量的固定液。溶在三氯甲烷中，待*溶解后，倒入盛有擔(dān)體的燒杯中，再向其中加入三氯甲烷至液面高出1～20m，搖勻后浸2h，然后在通風(fēng)柜中用紅外燈將溶劑揮發(fā)干（在揮發(fā)時(shí)須不斷搖動(dòng)容器，以使固定液涂漬均勻），再置于120℃烘箱中放置4h后備用。
3.4.4.3 色譜柱的填充方法
將色譜柱的尾端（接檢測(cè)器一端）用硅烷化玻璃棉塞住，接真空泵，另一端通過(guò)軟管接一漏斗。開動(dòng)真空泵后將固定相徐徐傾入色譜柱內(nèi)，并輕輕拍打色譜柱，使固定相在色譜柱內(nèi)填充緊密，至固定相不再抽入柱內(nèi)為止，裝填完畢后用硅烷化玻璃棉塞住色譜柱另一端。
3.4.4.4 色譜柱的老化
將填充好的色譜柱裝機(jī)通氮?dú)?，?/span>100℃為起點(diǎn)，每2h上升20℃的速度至230℃連續(xù)老化24h。（老化時(shí)色譜柱應(yīng)和檢測(cè)器斷開，以免污染檢測(cè)器）。
3.4.5 柱效能和分離度
總分離效能指標(biāo)：
對(duì)硫磷、馬拉硫磷 K1＝28.08
馬拉硫磷、甲基對(duì)硫磷 K2＝10.52
甲基時(shí)硫磷、樂(lè)果 K3＝28.60
樂(lè)果、敵敵畏 K4＝57.75
難分離物質(zhì)對(duì)馬拉硫磷、甲基對(duì)硫磷的峰高分離度0.9。
3.5 試樣預(yù)處理時(shí)使用的儀器
3.5.1 樣品瓶：1L的玻璃磨口瓶。
3.5.2 蒸發(fā)濃縮器：K-D式。
3.5.3 分液漏斗：250mL、500mL。
3.5.4 水浴鍋。
3.5.5 微量注射器：10?L。
3.5.6 繼電器及接點(diǎn)溫度計(jì)。
3.5.7 pH計(jì)。
4 樣品
4.1 樣品性質(zhì)
水樣，在水中有機(jī)磷農(nóng)藥不太穩(wěn)定，易降解。
4.2 水樣采集及貯存方法
用玻璃磨口瓶（3.5.1）采集樣品，在采樣前用水樣將取樣瓶沖洗2～3次。水樣應(yīng)在弱酸性狀態(tài)下保存，因敵敵畏及敵百蟲易降解，應(yīng)盡快分析，其余四種有機(jī)磷農(nóng)藥的水樣可在4℃冷藏箱中保存三天。
4.3 試樣的預(yù)處理
4.3.1 甲基對(duì)硫磷、對(duì)硫磷、馬拉硫磷、樂(lè)果、敵敵畏的測(cè)定
搖勻樣品并經(jīng)過(guò)濾去除機(jī)械雜質(zhì)，取試樣100mL（或視水質(zhì)而定）于250mL燒杯中。調(diào)PH至6.5，然后將試樣轉(zhuǎn)移至250mL分液漏斗中，用三氯甲烷萃取三次。每次三氯甲烷用量5mL（相比為1：20），振搖5min，靜置分層。合并三氯甲烷，收集水層。將合并后的三氯甲烷經(jīng)無(wú)水硫酸鈉脫水后。供測(cè)定用。無(wú)水硫酸鈉脫水柱內(nèi)徑1cm，長(zhǎng)15cm，無(wú)水硫酸鈉段8cm。
如三氯中烷層中有機(jī)磷農(nóng)藥含量太低，在zui小檢出量以下，則需經(jīng)K－D濃縮器濃縮至所需體積后再進(jìn)行測(cè)定。如三氯甲烷層中有機(jī)磷農(nóng)藥含量太高，則需少取試樣或試樣經(jīng)稀釋后再進(jìn)行萃取。
4.3.2 敵百蟲的測(cè)定
將4.3.1收集的水層調(diào)pH至9.6后，倒入250mL錐形瓶中，蓋好瓶塞，置于50℃的水浴鍋中進(jìn)行堿解，不斷搖動(dòng)錐形瓶。15min后取出錐形瓶，冷至室溫后，調(diào)pH全6.5，將此溶液轉(zhuǎn)移至250mL分液漏斗中，以下操作同4.3.1。
注：在試樣預(yù)處理時(shí)，僅用pH計(jì)調(diào)節(jié)，不能用pH試紙代替。
5 操作步驟
5.1 儀器的調(diào)整
5.1.1 汽化室溫度；240℃。
5.1.2 柱箱溫度：170℃。
5.1.3 檢測(cè)器溫度：230℃。
5.1.4 載氣流速：60mL／min。
5.1.5 氫氣流速：160mL／min。
5.1.6 記錄器紙速：4mm／min。
5.1.7 衰減：根據(jù)樣品中被測(cè)組分含量調(diào)節(jié)記錄器的衷減。
5.2 校準(zhǔn)
5.2.1 定量方法
外標(biāo)法。
5.2.2 標(biāo)準(zhǔn)樣品
5.2.2.1 使用次數(shù)：使用標(biāo)準(zhǔn)樣品周期性的重復(fù)校準(zhǔn)。視儀器的穩(wěn)定性決定周期長(zhǎng)短。一般可在測(cè)定三個(gè)試樣后校準(zhǔn)一次。
5.2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備
a.儲(chǔ)備溶液：以三氯甲烷（2.2.2）為溶劑，準(zhǔn)確稱取一定量的色譜純標(biāo)準(zhǔn)樣品（2.2.1），準(zhǔn)確至0.2mg，分別配制濃度為2.5mg／mL的甲基對(duì)硫磷、對(duì)硫磷、馬拉硫磷儲(chǔ)備溶液；濃度為0.75mg／mL的敵敵畏儲(chǔ)備溶液；濃度為5.0mg／mL的樂(lè)果儲(chǔ)備溶液。敵敵畏儲(chǔ)備溶液在4℃可存放兩個(gè)月。其余可存放半年。
b.中間溶液的配制：移取一定量的儲(chǔ)備溶液（a），用三氯甲烷做稀釋劑，分別配制成濃度為50µg／mL的甲基對(duì)硫磷、對(duì)硫磷、馬拉硫磷中間溶液；濃度為7.5µg／mL的敵敵畏中間溶液；濃度為100µg／mL的樂(lè)果中間溶液。
c.標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制：根據(jù)檢測(cè)器的靈敏度及所測(cè)水佯濃度.分別等體積移取中間溶液（b），于同一容量瓶中，用三氯甲烷做稀釋劑，配制所需濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，在4℃可存放半個(gè)月。
5.2.2.3 氣相色譜中使用標(biāo)準(zhǔn)樣品的條件 a.標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)樣體積與試樣進(jìn)樣體積相同，標(biāo)準(zhǔn)樣品的響應(yīng)值應(yīng)接近試樣的響應(yīng)值； b.調(diào)節(jié)儀器的重復(fù)性條件：一個(gè)樣品連續(xù)注射進(jìn)樣兩次，其峰高相對(duì)偏差不大于5％，即認(rèn)為儀器處于穩(wěn)定狀態(tài)； c.標(biāo)準(zhǔn)樣品與試樣盡可能同時(shí)進(jìn)樣分析。5.2.3 校準(zhǔn)數(shù)據(jù)的表示試樣中組分按式（1）校準(zhǔn)：
式中：Xi——試樣中組分i的含量，mg／L；
Ai——試樣中組分i的峰高，cm；
AE——標(biāo)準(zhǔn)溶液中組分i的峰高，cm；
Ei——標(biāo)準(zhǔn)樣品中組分i的含量，mg／L。
5.3 試驗(yàn)
5.3.1 進(jìn)樣
a.進(jìn)樣方式：注射器進(jìn)樣。
b.進(jìn)樣量：一般進(jìn)樣量5?L，zui大進(jìn)樣量10?L。
c.操作：用清潔注射器（3.5.5）在待測(cè)樣品中抽吸幾次后，抽取所需進(jìn)樣體積，迅速將注射器中樣品注進(jìn)色譜儀中，并立即拔出注射器。
5.4 色譜圖的考察
5.4.1 標(biāo)準(zhǔn)色譜圖（見下圖）（略）
5.4.2 定性分析
a.組分的出峰次序：敵敵畏（敵百蟲）、樂(lè)果、甲基對(duì)硫磷、馬拉硫磷、對(duì)硫磷。
b.保留時(shí)間：
敵敵畏 1min
樂(lè)果 10min
甲基對(duì)硫磷 13min 8s
馬拉琉磷 20min
對(duì)硫磷 24min15s
5.4.3 定量分析
5.4.3.1 色譜峰的測(cè)量
以峰的起點(diǎn)和終點(diǎn)聯(lián)線做為峰底，從峰高極大值對(duì)時(shí)間軸作垂線，從峰頂至峰底間的線段即為峰高。
5.4.3.2 計(jì)算
5.4.3.2.1 甲基對(duì)硫磷、對(duì)硫磷、馬拉硫磷、樂(lè)果、敵敵畏含量的計(jì)算：
式中：Ci——試樣中農(nóng)藥含量，mg／L；
Ci標(biāo)——標(biāo)樣中農(nóng)藥含量，mg／L；
hi——試樣中農(nóng)藥峰高，cm；
hi標(biāo)——標(biāo)樣中農(nóng)藥峰高，cm；
V1——標(biāo)樣進(jìn)樣體積，µL；
V2——提取液體積，mL；
V3——試樣進(jìn)樣體積，µL；
V6——被提取的水樣體積，mL；
K——試樣稀釋因子。
5.4.3.2.2
敵百蟲含量的計(jì)算
式中：
C——試樣中敵百蟲含量，mg／L；
C1——試樣中由敵百蟲轉(zhuǎn)化生成的敵敵畏含量，mg／L；
0.86——敵敵畏、敵百蟲分子量之比。
6 結(jié)果的表示
6.1定性結(jié)果
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)色譜圖各組分的保留時(shí)間確定被測(cè)試樣中的組分?jǐn)?shù)目及組分名稱。
6.2 定量結(jié)果
6.2.1 含量的表示方法
根據(jù)計(jì)算公式計(jì)算出出現(xiàn)組分的含量，結(jié)果以兩位有效數(shù)字表示。
6.2.2 精密度及準(zhǔn)確度（見表1）
五個(gè)實(shí)驗(yàn)室分析含敵敵畏
0.104mg／L、樂(lè)果1.38mg／L、甲基對(duì)硫磷0.81mg／L、對(duì)硫磷1.31mg／L
、乙基硫磷0.77mg／L統(tǒng)一樣品，其重復(fù)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)和再現(xiàn)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別列于表1。
表1 精密度及準(zhǔn)確度 | 農(nóng)藥 | 樣品濃度 mg／L | 精密度 | 準(zhǔn)確度 | | 重復(fù)性 | 再現(xiàn)性 | 加標(biāo)回收宰 ％ | | 標(biāo)準(zhǔn)偏差 | 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 ％ | 標(biāo)準(zhǔn)偏差 | 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 ％ | | 敵敵畏 樂(lè) 果 甲基對(duì)硫磷 馬拉硫磷 對(duì)硫磷 敵百蟲 | 0.1 1.29 0.78 1.21 0.77 | 0.18 0.60 0.50 0.48 0.42 | 4.8 4.3 3.2 4.3 3.8 | 0.22 0.82 1.22 0.76 0.51 | 5.4 2.7 3.4 5.2 1.1 | 101.3 92.2 99.0 97.2 99.8 98.1 | 儀器靈敏度調(diào)至zui高時(shí)，產(chǎn)生色譜峰高于2倍噪音時(shí)的進(jìn)樣量作為儀器的檢出限。
表2 檢出限及測(cè)定下限 | 數(shù)量 農(nóng)藥 | 檢出限 g | 測(cè)定下限 mg／L | | 敵敵畏 敵百蟲 樂(lè)果 甲基對(duì)硫磷 馬拉硫磷 對(duì)硫磷 | 4.0×10－10 3.4×10－10 3.8×10－9 2.8×10－9 4.3×10－9 3.6×10－9 | 6.0×10－5 5.1×10－5 5.7×10－4 4.2×10－4 6.4×10－4 5.4×10－4 | | 
